袁立飞;刘静娜;张越;张武林;杨赞章;韩龙辉;张铭连;目的探讨清热明目颗粒对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠的治疗作用以及对炎症细胞因子表达的影响。方法 24只Lewis大鼠随机分为空白组、EAU组、实验组,雷公藤组4组,每组各6只。利用光感受器间维生素A结合蛋白(IRBP)免疫大鼠制作EAU模型,空白组注射等量不含IRBP的乳化液。于免疫的同时,实验组给予3.5 g/(kg·d)清热明目颗粒悬浊液灌胃;雷公藤组给予6.8μg/(kg·d)含雷公藤甲素的悬浊液灌胃;空白组和EAU组给予同等剂量蒸馏水灌胃。各组给药均为每日1次,连续7 d。各组大鼠在炎症高峰期(第15 d)摘取眼球制备视网膜切片,根据Caspi组织学分级法评分,分离各组大鼠脾脏和腹部淋巴结淋巴细胞,采用ELISA法检测IL-2、IL-10、IL-17、IFN-γ表达水平。结果 (1)炎症评分:EAU组、实验组和雷公藤组均于免疫后8 d开始发病,EAU组炎症反应评分明显增高,与空白组差异有统计学意义(t=49.019,P=0.000),而实验组和雷公藤组与空白组差异无统计学意义。免疫第10 d,各组炎症反应均升高,与空白组差异均有统计学意义(t_(EAU组)=7.904,P=0.000,t_(实验组)=3.980,P=0.001,t_(雷公藤组)=7.250,P=0.000),而实验组评分低于EAU组(t=3.925,P=0.001)和雷公藤组(t=3.271,P=0.004),差异有统计学意义。免疫第15 d,各组炎症反应达高峰,实验组评分低于EAU组(t=7.071,P=0.000),差异有统计学意义。(2)组织病理学:实验组视网膜有炎症细胞浸润和结构破坏较轻,组织病理学评分低于EAU组(t=10.675,P=0.000),和雷公藤组(t=5.115,P=0.000),差异有统计学意义。(3)炎性细胞因子:EAU组淋巴细胞培养上清液IL-2、IL-17、IFN-γ表达升高,IL-10表达降低(F_(IL-2)=912.986,F _(IL-17)=103.286,F_(INF-γ)=1852.132,F_(IL-10)=291.765,均P=0.000),均有统计学意义;与EAU组比较,淋巴细胞培养上清液IL-2、IL-17、IFN-γ表达量在实验组(t IL-2=31.041,t IL-17=7.369,t INF-γ=16.363,均P=0.000)和雷公藤组(t_(IL-2)=17.137,t_(IL-17)=8.239,t_(INF-γ)=5.037,均P=0.000)均降低,IL-10表达量在实验组(t=29.362,P=0.000)和雷公藤组(t=11.566,P=0.000)均升高,差异均有统计学意义;与雷公藤组相比,实验组IL-2、IFN-γ、IL-17表达量低,差异有统计学意义(t _(IL-2)=30.373,t_(INF-γ)=11.327,均P=0.000;t_(IL-17)=2.918,P=0.015),而IL-10表达量高,差异有统计学意义(t=17.796,P=0.000)。结论清热明目颗粒能对EAU具有良好的抗炎作用,强度优于雷公藤片,其作用机制可能与抑制IL-2、IL-17、IFN-γ相关炎症因子的分泌,促进IL-10的分泌,调节细胞免疫有关。
2021年11期 v.31 770-775+782页 [查看摘要][在线阅读][下载 2868K] 何昭华;梁文旺;钟茜;目的研究白杨素对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤的影响,并探讨其机制是否与调控长链非编码RNA(lncRNA)生长抑制特异性转录本5(GAS5)表达有关。方法采用30 mmol/L葡萄糖诱导HRMECs建立细胞损伤模型。将细胞分为9组:正常组(NC)、高糖组(HG)、白杨素低剂量组(LCG)、白杨素中剂量组(MCG)、白杨素高剂量组(HCG)、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、HCG+GAS5小干扰RNA(si-GAS5)组、HCG+si-NC组。采用CCK-8法和流式细胞术分析细胞活力和凋亡,检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR检测GAS5表达量。结果 (1)GAS5表达:HG组与NC组比较降低(t=45.322,P=0.000),与MCG组比较降低(t=17.391,P=0.000),与HCG组比较降低(t=36.363,P=0.000),差异均有统计学意义;(2)MDA含量:HG组与NC组比较升高(t=36.123,P=0.000),与MCG组比较升高(t=7.510,P=0.002),与HCG组比较升高(t=27.228,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较升高(t=24.231,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较升高(t=21.766,P=0.000),差异均有统计学意义;(3)SOD活性:HG组与NC组比较降低(t=26.923,P=0.000),与MCG组比较降低(t=12.231,P=0.000),与HCG组比较降低(t=22.654,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较降低(t=29.259,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较降低(t=19.410,P=0.000),差异均有统计学意义;(4)凋亡率:HG组与NC组比较升高(t=36.811,P=0.000),与MCG组比较升高(t=8.896,P=0.001),与HCG组比较升高(t=24.091,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组升高(t=26.321,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较升高(t=14.135,P=0.000),差异均有统计学意义;(5)细胞活力(48 h、72 h):HG组与NC组比较降低(t_(48h)=9.507,P=0.001;t_(72h)=16.089,P=0.000),与MCG组比较降低(t_(48h)=4.406,P=0.012;t_(72h)=6.689,P=0.003),与HCG组比较降低(t_(48h)=7.884,P=0.001;t_(72h)=12.835,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较降低(t_(48h)=7.323,P=0.002;t_(72h)=13.244,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较降低(t_(48h)=4.909,P=0.008;t_(72h)=9.581,P=0.001),差异均有统计学意义。结论白杨素能够减弱高糖诱导的HRMECs凋亡和氧化应激损伤,其机制可能是通过上调lncRNA GAS5表达实现的。
2021年11期 v.31 776-782页 [查看摘要][在线阅读][下载 2552K]